數(shù)字PCR儀是分子生物學(xué)研究非常重要的工具，是一種用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)，基本原理是在試管中模擬細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制，即人為創(chuàng)造核酸半保留復(fù)制條件，使目的DNA在細(xì)胞外完成擴(kuò)增的過程，它可被看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制。
數(shù)字PCR儀維護(hù)保養(yǎng)
需要注意以下問題：
實(shí)驗(yàn)室使用的基因擴(kuò)增儀，熒光定量PCR儀都是高精度儀器。一旦儀器出現(xiàn)一些溫度或者檢測上的小偏差，則很可能對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生較大的影響。因此，學(xué)會(huì)日常保養(yǎng)和維護(hù)是尤為重要的。
1、儀器安置
儀器應(yīng)安放在濕度較低、灰塵較少并遠(yuǎn)離水源和熱源的地方，無腐蝕性氣體或強(qiáng)磁場干擾。
環(huán)境溫度建議在18~35℃之間。儀器之間應(yīng)保持50cm以上距離，降低儀器之間的影響。
2、樣品臺(tái)、熱蓋定期清潔
用95%乙醇配合棉簽、無塵布等工具，清潔樣品臺(tái)。之后運(yùn)行數(shù)字PCR儀，設(shè)定保持溫度為50℃，約5~10min，讓殘余液體揮發(fā)去除。
另外，熱蓋也應(yīng)該用酒精或純水定期清洗，確保熱蓋清潔，溫控性能良好。對(duì)于熒光定量PCR，清潔樣品臺(tái)和熱蓋的同時(shí)，去除灰塵等雜物，保證光路清潔，降低信號(hào)干擾。
3.使用前預(yù)熱
老款的PCR儀的性能比不上新款儀器，使用前需要進(jìn)行預(yù)熱，不僅對(duì)儀器維護(hù)有好處，還能節(jié)約實(shí)驗(yàn)時(shí)間。新款的儀器升溫快，但還是建議最好能在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前預(yù)熱2min，這樣可以有效延長儀器的使用壽命。
4.定期運(yùn)行維護(hù)
1.數(shù)字PCR儀需要定期檢測，視制冷方式而定一般半年至少一次。
2.PCR反應(yīng)的要求溫度與實(shí)際分布的反應(yīng)溫度是不一致的，當(dāng)檢測發(fā)現(xiàn)各孔平均溫度差偏離設(shè)置溫度大于1～2℃時(shí)，可以運(yùn)用溫度修正法糾正PCR實(shí)際反應(yīng)溫度差。
3.PCR反應(yīng)過程的關(guān)鍵是升、降溫過程的時(shí)間控制，要求越短越好，當(dāng)PCR儀的降溫過程超過60s，就應(yīng)該檢查儀器的制冷系統(tǒng)，對(duì)風(fēng)冷制冷的PCR儀要較*地清理反應(yīng)底座的灰塵；對(duì)其他制冷系統(tǒng)應(yīng)檢查相關(guān)的制冷部件。
4.一般情況如能采用溫度修正法糾正儀器的溫度時(shí)，不要輕易打開或調(diào)整儀器的電子控制部件，必要時(shí)要請(qǐng)專業(yè)人員修理或利用儀器電子線路詳細(xì)圖紙進(jìn)行維修。
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