光片掃描顯微鏡不是簡單成像的顯微鏡，而是可以用于在原子、分子尺度進(jìn)行加工和操作的工具。掃描探針顯微鏡的應(yīng)用領(lǐng)域是寬廣的，無論是物理、化學(xué)、生物、醫(yī)學(xué)等基礎(chǔ)學(xué)科，還是材料、微電子等應(yīng)用學(xué)科都有用武之地。

 

　　光片掃描顯微鏡的基本原理是基于量子隧道效應(yīng)。當(dāng)針尖和試樣面間距離足夠小時(<0.4nm)，在針尖和試樣面間施加一偏置電壓，便會產(chǎn)生隧道效應(yīng)，電子在針尖和試樣面之間流動，形成隧道電流。

 

　　鈣比率探針在溶液中均有熒光，測量時須洗去細(xì)胞外液探針，而進(jìn)入細(xì)胞后的探針其AM被分解后不能透出質(zhì)膜。由于這些探針要用紫外激發(fā)光作激發(fā)光源，會造成細(xì)胞的損傷，還會增加潛在的自發(fā)熒光，而且熒光發(fā)射峰波長也較短，須提高發(fā)光強度，因而其使用受到一定的限制。

 

　　膜電位熒光探針根據(jù)其對膜電位變化反應(yīng)速度的快慢分為快、慢兩類探針，各類均有10多種。DiBAC4(3)為常用的膜電位熒光探針，DiBAC4(3)為帶負(fù)電荷的陰離子慢反應(yīng)染料。該探針本身無熒光，當(dāng)進(jìn)入細(xì)胞與胞漿內(nèi)的蛋白質(zhì)結(jié)合后才發(fā)出熒光，測量時要求細(xì)胞浸在熒光染料中。

 

　　細(xì)胞內(nèi)活性氧基活性氧可影響細(xì)胞代謝，與蛋白質(zhì)、核酸、脂類等發(fā)生反應(yīng)，有些反應(yīng)是有害的，因此測量活性氧在毒理學(xué)研究中有一定的意義。根據(jù)檢測活性氧的不同可選擇不同的熒光探針。

 

　　由于某些毒性物質(zhì)尤其是促癌物可影響縫隙連接介導(dǎo)的物質(zhì)運輸，因此該方法也可用于鑒別對縫隙連接作用有潛在毒性的化學(xué)物質(zhì)。